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Isolierung und Charakterisierung von Einzeldomänen-Antikörpern durch mikrobielle Oberflächenpräsentation molekularer Bibliotheken

Steinmann, Björn (2015)
Isolierung und Charakterisierung von Einzeldomänen-Antikörpern durch mikrobielle Oberflächenpräsentation molekularer Bibliotheken.
Technische Universität
Ph.D. Thesis, Primary publication

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Item Type: Ph.D. Thesis
Type of entry: Primary publication
Title: Isolierung und Charakterisierung von Einzeldomänen-Antikörpern durch mikrobielle Oberflächenpräsentation molekularer Bibliotheken
Language: German
Referees: Kolmar, Prof. Dr. Harald ; Neumann, Prof. Dr. Siegfried ; Göringer, Prof. Dr. H. Ulrich ; Layer, Prof. Dr. Paul G.
Date: 2015
Place of Publication: Darmstadt
Date of oral examination: 15 December 2014
Abstract:

Die Dissertationsschrift umfasst die Arbeiten zur Erstellung und Durchmusterung von kameliden VHH-Antikörperbibliotheken (variable chain of a heavy-chain of a heavy-chain antibody) aus Lama glama mittels Phagen- und Hefe-Oberflächenpräsentation. Dabei werden zunächst die Probenentnahme am Versuchstier, die Aufbereitung der Blutproben sowie die Extraktion der genetischen Information für das VHH-Antikörperrepertoire beschrieben. Durch Anwendung geeigneter Klonierungs- und Rekombinations-Methoden konnten daraus erfolgreich verschie-dene VHH-Antikörper-Plattformen erstellt werden. Dabei wurde sowohl ein naives VHH-Repertoire aus einer Population von adulten Tieren, als auch ein durch Immunisierung affini-tätsgereiftes Repertoire eines einzelnen Tieres eingesetzt und bezüglich ihres Potentials, anti-genspezifische VHH-Antikörper isolieren zu können, untersucht. Beide Repertoires wurden in eine Hefe-Durchmusterungsplattform integriert und mehrfach erfolgreich nach Bindemolekülen durchmustert. Das naive Repertoire wurde zusätzlich für die Erstellung einer Phagen-Bibliothek eingesetzt und ebenfalls erfolgreich für die Durchmusterung eingesetzt.

Alternative Abstract:
Alternative AbstractLanguage

The thesis investigates the generation and screening of camelid VHH antibody libraries (variable chain of a heavy-chain of a heavy-chain antibody) from Lama glama by phage and yeast display. First, the blood sample collection, the sample processing, and the extraction of the genetic information for the VHH antibody repertoire has been described. By using appropriate cloning and recombination methods, different VHH antibody platforms were generated. Therefore, a naïve as well as an immune maturated repertoire has been used. Both repertoires were integrated into a yeast display platform and successfully screened several times for target specific binding molecules. The naïve repertoire was also used for the generation of a phage display library, which has also been screened successfully for antigen-specific VHH molecules.

English
URN: urn:nbn:de:tuda-tuprints-44026
Classification DDC: 500 Science and mathematics > 500 Science
500 Science and mathematics > 570 Life sciences, biology
Divisions: 07 Department of Chemistry
Date Deposited: 26 Feb 2015 07:21
Last Modified: 09 Jul 2020 00:53
URI: https://tuprints.ulb.tu-darmstadt.de/id/eprint/4402
PPN: 386765421
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