Hämophilie A ist eine Störung der Blutgerinnung, die weltweit 400 000 Menschen betrifft. Neben verlängerten Blutungszeiten leiden Patienten unter spontanen und inneren Blutungen, die ihr tägliches Leben beeinflussen. Die Behandlung erfolgt mithilfe von therapeutischem FVIII, welcher entweder aus Plasma gewonnen oder rekombinant hergestellt wird. Ob eine Behandlung prophylaktisch oder nur bei Bedarf erfolgt, hängt von der Schwere der Krankheit und den Lebensumständen des Patienten ab. Obwohl die Behandlung den meisten Patienten ein nahezu normales Leben ermöglicht, können Patienten Inhibitoren gegen den therapeutischen FVIII entwickeln, die diesen inaktivieren. In den meisten Fällen kann dies durch eine Immuntoleranztherapie behandelt werden. Diese Therapie ist jedoch lang, strapaziös und sehr teuer. In den vergangenen Jahren wurden verschiedene rekombinante FVIII Produkte mit Modifikationen zur Verlängerung der in vivo Halbwertszeit entwickelt. Ein FVIII Produkt mit einer verringerten Immunogenität wurde jedoch noch nicht publiziert. Ein deimmunisierter FVIII könnte die Wahrscheinlichkeit einer Inhibitorentstehung verringern und so eine bessere Therapie für die Patienten ermöglichen. In dieser Thesis wird eine deimmunisierte FVIII Variante entwickelt. Die Arbeit umfasst die vollständige Entwicklung, begonnen mit den in silico Berechnungen, über die Produktion und Reinigung, bis zu den in vitro und in vivo Analysen. Der Deimmunisierungsansatz beruht auf einer Verringerung der FVIII-Peptidpräsentation auf der Oberfläche von antigenpräsentierenden Immunzellen. Dadurch soll verhindert werden, dass naive T-Zellen aktiviert werden. Ohne FVIII-spezifische T-Helferzellen können wiederum keine naiven B-Zellen aktiviert werden, was zu einem Ausbleiben von hochaffinen Inhibitoren führt. Dadurch wird die Produktion der Antikörper bereits auf der Ebene der T-Zellen unterbunden. Während der in silico Analyse wurden Peptide identifiziert, die mit hoher Affinität an den Haupthistokompatibilitätskomplex II binden, welcher für die Präsentation von Peptiden auf der Zelloberfläche benötigt wird. Anschließend wurden Aminosäureaustausche vorgeschlagen, um diese Bindung zu verringern. Der Einbau der Mutationen in die FVIII Sequenz wurde in drei Runden durchgeführt, begonnen mit dem Einbau von Einzelmutationen, gefolgt von der Kombination mehrerer Mutationen bis zur finalen Kombination aller Mutationen. Nur Mutationen, die zu einem funktionalen FVIII führten, wurden in die nächste Runde transferiert. Final konnten 19 Mutationen in die Sequenz eingebaut werden. Dies führte, basierend auf in silico Berechnungen, zu einer Reduzierung des Immunogenitätswerts von 7 auf -11. Eine vollständige Deimmunisierung war jedoch nicht möglich, da besonders aktivitäts-, faltungs- und interaktionsrelevante Regionen des FVIII nicht verändert werden konnten. Funktionale und strukturelle Analysen des mutierten FVIII zeigten Ähnlichkeiten zu einem Kontroll-FVIII und zu kommerziell erwerblichen FVIII Produkten. Zusätzlich wurde ein in vitro DC-T-Zell Test entwickelt, um die reduzierte Immunogenität der deimmunisierten FVIII Variante nachzuweisen, da dies mit den zur Verfügung stehenden in vivo Modellen nur begrenzt möglich war. Für diesen Test wurden DCs mit verschiedenen FVIII Produkten vorinkubiert und anschließend zusammen mit CD4+ T-Zellen kultiviert. Final wurde die Proliferation von CD4+ T-Zellen analysiert. Aus der untersuchten CD4+ T-Zell Population wurden vor der Kultivierung die regulatorischen T-Zellen depletiert. Dies wurde durchgeführt, um den Test sowohl mit Zellen von gesunden Spendern als auch von Hämophilie A Patienten durchführen zu können. Mit Zellen von gesunden Spendern bestätigte der Test eine signifikant verringerte Immunogenität des mutierten FVIII im Vergleich zum Kontroll-FVIII. Diese Ergebnisse müssen noch mit Zellen von Hämophilie A Patienten belegt werden. Leider konnte diese verringerte Immunogenität in vivo nur begrenzt nachgewiesen werden. Zwei Mausmodelle wurden getestet, jedoch hatten diese entweder ein humanes Immunsystem oder einen FVIII-Knockout. Eine Kombination aus beiden Modellen wäre optimal gewesen, war jedoch nicht verfügbar. Insgesamt zeigt diese Thesis den ersten deimmunisierten und aktiven FVIII mit 19 Mutationen, der in einem in vitro Test mit Zellen von gesunden Spendern eine verringerte Immunogenität aufweist. Wenn diese Ergebnisse in vivo bestätigt werden können, kann dieses Molekül die Therapie von Hämophilie A Patienten deutlich verbessern, indem es das Risiko einer Inhibitorentstehung verringert. Diese Verringerung der Inhibitorinzidenz würde zudem auch die Therapiekosten verringern, da Inhibitor-negative Patienten keine teure Immuntoleranztherapie benötigen.