Survivin, das kleinste und funktionell einzigartige Mitglied der Inhibitor of Apoptosis Protein (IAP) Familie ist in der Mehrzahl maligner Zellen überexpremiert und stellt einen wesentlichen prädiktiven molekularen Marker für eine Metastasierung und das Überleben von Patienten nach Strahlentherapie dar. In diesem Zusammenhang wurde zudem gezeigt, dass die Rolle von Survivin in der zellulären Strahlenantwort weit über eine alleinige Hemmung der apoptotischen Reaktionskaskaden hinausgeht, sondern vielmehr auch Caspase-unabhängige Mechanismen wie eine Regulation des Zellzyklus und der Reparatur von DNA-Schäden beinhaltet. Um die Rolle von Survivin in der zellulären Strahlenantwort und Tumorzellmotilität detaillierter zu untersuchen, war es Ziel der vorliegenden Arbeit, eine Reihe von grün fluoreszierendes Protein (GFP) markierten Survivin Deletions- und Phosphorylierungsmutanten zu generieren und stabil exprimierende Klone kolorektaler SW480 Karzinomzellen herzustellen. Dazu wurden wildtyp-Survivin und rekombinante Proteine mit fehlenden Bindungsstellen für X-linked IAP (XIAP), Mikrotubuli, Hitzeschockprotein 90 (Surv-ΔXIAP/ΔMicTub/ΔHsp90), die Baculovirus IAP Repeat (BIR) Domäne (Surv-ΔBIR), sowie Mutanten der Phosphorylierungsstellen S20, T34 und T117 (Survivin S20A/ S20D/T34A/T34D/T117A/ T117D) in einem pEGFP-N1 Vektor System zur Expression gebracht. Anschließend wurden die Zellen unter physiologischen Bedingungen in drei-dimensionalen (3D) Koloniebildungstests eingesetzt, die Expression der DNA-Doppelstrangbruchmarker γH2AX und 53BP1 mittels Immunfluoreszenz quantifiziert und die Zellzyklusverteilung, Induktion von Apoptose und die Caspase 3/7 Aktivität bzw. die Transmigrationsfähigkeit nach Bestrahlung mit Dosen von 1 bis 6 Gy untersucht. Während die Hemmung von endogenem Survivin durch RNA-Interferenz (siRNA) zu einer signifikanten Minderung des 3D klonogenen Überlebens und einer erhöhten Anzahl residueller γH2AX/53BP1 Foci in pEGFP-N1 Kontrollvektor, Surv. ΔXIAP, Surv. ΔBIR und Surv. T34A transfizierten Zellen führte, konnte das radiogene Zellüberleben und die DNA-Reparaturkapazität in stabil Surv. wt, Surv. ΔMicTub, Surv. ΔHsp90 und Surv. T34D überexprimierenden Zellklonen rekonstituiert werden. Darüber hinaus führte die Deletion der BIR Domäne, der Mikrotubuli und der Hsp90 Bindungsstelle zur Induktion eines G2/M Zellzyklus-Arrestes, einem erhöhten Anteil apoptotischer SubG1 Zellen, einer gesteigerten Caspase 3/7 Aktivität und einer signifikanten Hemmung der Transmigration von SW480 Zellen nach Attenuation des endogenen Survivins. Auf molekularer Ebene gelang bei Konstrukten aus Surv. ΔXIAP and T34A Phospho-mutanten überexpremierenden Zellen keine Ko-Immunpräzipitation mit dem DNA Reparaturprotein DNA Proteinkinase (DNA-PKcs), während dies bei wt-Survivin Klonen sowie bei der T34D phospho-mimetischen Mutante möglich war. Zusammengefaßt bestätigen diese Daten die Aktivität von Survivin als Radioresistenzfaktor, der die zelluläre Bestrahlungsantwort durch multiple Mechanismen, einschließlich der DNA- Doppelstrangbruch-Reparatur und der Induktion eines Zellzyklus Arrestes und von Apoptose zu modulieren vermag. Darüber hinaus konnte hier erstmals gezeigt werden, dass die XIAP Bindungs- und T34 Phosphorylierungs-, nicht jedoch die Microtubuli und Hsp90 Bindungsstellen essentiell für das klonogene Zellüberleben nach Bestrahlung und die Modulation der DNA Schadensreparatur sind. Dies beruht, zumindest teilweise, auf der Beeinträchtigung der Interaktion mit dem Protein DNA-PKcs. Im Gegensatz dazu sind für die Regulation des Zellzklus, die Inhibition der Apoptose und das Migrationsverhalten der kolorektalen Adenokarzinomlinie SW480 sowohl die XIAP-, die Hsp90- und die Mikrotubuli-Bindungsstellen wie auch die BIR-Domäne wesentlich.