Im Zusammenhang mit der Produktion rekombinanter monoklonaler Antikörper stellt die Verwendung von Hybridomzellen aufgrund ihrer Lipid-Auxotrophie eine Herausforderung dar. Der Ersatz von Serum durch Lipoproteine zur Lipidsupplementierung in SP2/0-Zellen ist möglich, allerdings bleiben derzeit noch Probleme, die im Rahmen dieser Dissertation angegangen werden sollen. Die inhärente Variabilität von Lipoprotein-Chargen, die aus tierischen Quellen stammen, hat einen erheblichen Einfluss auf das Zellwachstum und die Gesamteffizienz des vorgeschalteten Zellkulturprozesses. Ziel dieser Forschungsarbeit ist es, die Beziehung zwischen der Variabilität von Lipoprotein-Chargen und der Leistung der vorgeschalteten Zellkulturprozesse zu klären. Es wurde eine Untersuchung unter Verwendung mehrerer Lipoprotein-Chargen desselben Lieferanten durchgeführt. Bestimmte Chargen wiesen während der Zellkulturprozesse schlechte Leistungsmerkmale auf, die sich in einer Apoptoseinduktion und einem vorzeitigen Rückgang der Lebensfähigkeit während der Fed-Batch-Produktion äußerten. Eine physikalisch-chemische Charakterisierung des Lipoproteinzusatzes bestätigte, dass Lipoproteine überwiegend Sterole, Fettsäuren und Apolipoproteine enthalten, wobei ein beträchtlicher Anteil dieser Bestandteile oxidiert ist. Die Induktion einer kontrollierten Oxidation in Lipoprotein-Formulierungen führte zu beobachtbaren Veränderungen, einschließlich einer Braunfärbung der Lipoproteinzusätze und einer erhöhten UV-Absorption, die wiederum mit einer verminderten Leistung in Zellkulturprozessen korrelierte. Diese Erkenntnis ermöglichte die Festlegung eines Schwellenwerts für die Absorption bei 276 nm, der die Identifizierung von oxidierten und schlecht funktionierenden Chargen von Lipoproteinzusätzen erleichtert. Diese Methode dient dazu, Lipoprotein-Chargen mit schlechter Leistung präventiv zu erkennen und aus dem Herstellungsprozess auszuschließen, wodurch die Produktionsstabilität erhöht wird. Insbesondere wurde festgestellt, dass die chemischen Verbindungen, die für das Absinken der Lebensfähigkeit verantwortlich sind, bereits im Rinderserum-Rohmaterial vorhanden sind und nicht während des Umwandlungsprozesses in Lipoproteinzusätze eingeführt wurden. Um die durch Lipoproteine verursachten Einschränkungen zu überwinden, wurden chemisch definierte Lipidzusätze formuliert. Unter Verwendung von Methyl-Beta-Cyclodextrin-Einschlusskomplexen wurden Fettsäuren und Cholesterin effektiv in Zellkulturmedien solubilisiert. Das Lipid-Cyclodextrin-Gleichgewicht sowie die Fettsäure- und Cholesterinverhältnisse wurden optimiert, um den Lipidbedarf der SP2/0-Zellen zu decken und gleichzeitig die zytotoxischen Auswirkungen der Cyclodextrinverwendung abzuschwächen. Obwohl die Cyclodextrin-Einschlusskomplexe mit Lipiden das Potenzial zeigten, Lipoproteine im Prozess zu ersetzen, erbrachten sie eine minderwertige Leistung, die durch einen frühen Rückgang der Lebensfähigkeit der Zellen und ein verringertes Gesamtwachstum gekennzeichnet war. Es wurde eine Supplementierung mit verschiedenen Verbindungen untersucht, wobei sich Trolox als vielversprechender Kandidat erwies, der die mit der Oxidation verbundenen Probleme wirksam abschwächt. Diese Ergebnisse sollen dazu beitragen, die Formulierung von Zellkulturmedien weiter zu optimieren und Parameter zu identifizieren, die das Wachstum und die Produktionsleistung von Zellen für die rekombinante Antikörperproduktion beeinflussen.