Das gehirnspezifische Protein TMP 83.5

Ausgehend von einem cDNA-Fragment unbekannter Funktion, das im Verlauf eines Programmes zur Identifizierung Blut-Hirn-Schranke-spezifischer Proteine isoliert wurde, konnten in unserem Arbeitskreis zwei bisher noch nicht beschriebene, gehirnspezifische mRNA-Sequenzen (tmp und sp 83.5) charakterisiert werden. Die Transkripte kodieren möglicherweise für ein noch nicht beschriebenes potenzielles Membranprotein (TMP 83.5) sowie für dessen lösliche Isoform SP 83.5. Unter Verwendung eines peptidspezifischen Antiserums konnte in der vorliegenden Arbeit das vermutliche Transmembranprotein in Western Blot-Analysen von Membranfraktionen des Schweinegehirns nachgewiesen sowie mittels Immunaffinitätschromatographie erstmals aus Gehirngewebe isoliert werden. Das cytosolische Protein SP 83.5 konnte dagegen weder in Western Blot-Analysen noch mittels Immunaffinitätschromatographie im Schweinegehirn nachgewiesen werden, so dass über dessen tatsächliches Vorkommen keine Aussagen getroffen werden können. Die mit 83.5-spezifischen cRNA-Sonden durchgeführten in situ-Hybridisierung zur Bestimmung des proteinbildenden Zelltyps zeigten erstmals, dass die Transkripte tmp und sp 83.5 von den unterschiedlichsten Neuronentypen in der Groß- und Kleinhirnrinde des Schweins gebildet werden. Die im Rahmen dieser Arbeit verfolgte Vorgehensweise ermöglichte somit die Charakterisierung eines neuartigen, neuronalen Transmembranproteins, bei dem es sich basierend auf computergestützten Sequenzanalysen um ein Rezeptormolekül bzw. um die Untereinheit eines größeren Rezeptorkomplexes in Nervenzellen handeln könnte.