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Das gehirnspezifische Protein TMP 83.5

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Oberthür, Angela Maria :
Das gehirnspezifische Protein TMP 83.5.
[Online-Edition]
TU Darmstadt
[Ph.D. Thesis] , (2002)

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 Kapitel 1-4 - [PDF]
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        Abstract

        Ausgehend von einem cDNA-Fragment unbekannter Funktion, das im Verlauf eines Programmes zur Identifizierung Blut-Hirn-Schranke-spezifischer Proteine isoliert wurde, konnten in unserem Arbeitskreis zwei bisher noch nicht beschriebene, gehirnspezifische mRNA-Sequenzen (tmp und sp 83.5) charakterisiert werden. Die Transkripte kodieren möglicherweise für ein noch nicht beschriebenes potenzielles Membranprotein (TMP 83.5) sowie für dessen lösliche Isoform SP 83.5. Unter Verwendung eines peptidspezifischen Antiserums konnte in der vorliegenden Arbeit das vermutliche Transmembranprotein in Western Blot-Analysen von Membranfraktionen des Schweinegehirns nachgewiesen sowie mittels Immunaffinitätschromatographie erstmals aus Gehirngewebe isoliert werden. Das cytosolische Protein SP 83.5 konnte dagegen weder in Western Blot-Analysen noch mittels Immunaffinitätschromatographie im Schweinegehirn nachgewiesen werden, so dass über dessen tatsächliches Vorkommen keine Aussagen getroffen werden können. Die mit 83.5-spezifischen cRNA-Sonden durchgeführten in situ-Hybridisierung zur Bestimmung des proteinbildenden Zelltyps zeigten erstmals, dass die Transkripte tmp und sp 83.5 von den unterschiedlichsten Neuronentypen in der Groß- und Kleinhirnrinde des Schweins gebildet werden. Die im Rahmen dieser Arbeit verfolgte Vorgehensweise ermöglichte somit die Charakterisierung eines neuartigen, neuronalen Transmembranproteins, bei dem es sich basierend auf computergestützten Sequenzanalysen um ein Rezeptormolekül bzw. um die Untereinheit eines größeren Rezeptorkomplexes in Nervenzellen handeln könnte.

        Item Type: Ph.D. Thesis
        Erschienen: 2002
        Creators: Oberthür, Angela Maria
        Title of the item: Das gehirnspezifische Protein TMP 83.5
        Language of the item: Deutsch
        Uncontrolled Keywords: Membranrezeptor, cytosolische Isoform, Peptidantikörper,
        Keywords/Subjects (SWD): Gehirn, Nervenzelle, Membranproteine, Polyklonaler Antikörper, In-situ-Hybridisierung, Immunoblot, Affinitätschromatographie
        Sachgruppe der Dewey Dezimalklassifikation (DDC): 500 Naturwissenschaften und Mathematik > 540 Chemie
        Division(s): Fachbereich Chemie
        Date Deposited: 17 Oct 2008 11:21
        Last Modified: 05 May 2011 18:58
        Official URL: http://elib.tu-darmstadt.de/diss/000201
        URN: urn:nbn:de:tuda-tuprints-2010
        Lizenz (Kurzform): Einfaches Publikationsrecht für die ULB Darmstadt
        Referees: Friedl, Prof. Dr. Peter
        Date of refereeing/review / Verteidigung / mdl. Prüfung: 04 February 2002
        Title (translated) (übersetzt):
        Title (translated)Language of translated title
        TMP 83.5, a brainspecific proteinEnglish
        Keywords:
        KeywordsLanguage
        Membranrezeptor, cytosolische Isoform, Peptidantikörper,Deutsch
        membrane receptor, cytosolic isoform, anti-peptide antibodyEnglish
        Abstract (translated):
        Abstract (translated)Language of translated abstract
        Based on a cDNA fragment of unknown function, which was originally identified as part of a study directed toward the identification of blood brain barrier specific proteins, our group has characterized two previously unknown mRNA sequences (tmp and sp 83.5) specific for the brain. These transcripts decode presumably for a membrane protein (TMP 83.5) and its soluble isoform SP 83.5, respectively. In this work, the assumed transmembrane protein was detected with the aid of peptide specific antibodies in Western Blot experiments with membrane fractions of pig brains, and was isolated from pig brain tissue using immunoaffinity chromatography for the first time. The cytosolic protein SP 83.5, on the other hand, was detected neither in Western Blot experiments nor by affinity chromatography. To determine protein producing cell types, in situ hybridization studies employing 83.5 specific cRNA were undertaken. With this technique, it was shown that both transcripts tmp and sp 83.5 are produced by a large set of neuronal cells in the pig cerebrum and cerebellum. Therefore, the characterization of a new transmembrane protein was accomplished in this work. Based on sequence analysis, there is evidence that this protein might function as a receptor or a subunit of a larger receptor complex in mammalian nerve cells.English
        URI: http://tuprints.ulb.tu-darmstadt.de/id/eprint/201
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        OAI 2.0-Basis-URL: http://tuprints.ulb.tu-darmstadt.de/cgi/oai2 tuprints runs on EPrints 3.
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