Gentherapeutische Anwendungen gewinnen zunehmend an Bedeutung in der modernen Medizin, im Besonderen auch in der Krebstherapie. Genetisch veränderte T-Zellen, die einen chimären Antigen-Rezeptor (CAR) exprimieren, haben beeindruckende anti tumorale Wirksamkeit in Patienten gezeigt, die an B-Zell Erkrankungen litten. Dies führte 2017 zur Marktzulassung der ersten CAR-T-Zell Therapie in den Vereinigten Staaten von Amerika. Eine der größten Herausforderungen der Gentherapie bleibt jedoch der zielgerichtete Gentransfer, sodass eine ex vivo Manipulation der Zellen noch immer unerlässlich ist. Diese personalisierte Behandlung ist mit hohem Aufwand und Kosten verbunden. Rezeptor targetierte Vektoren vermitteln selektiven Gentransfer in einen bestimmten Zelltyp und könnten einen alternativen Ansatz zur derzeitigen Behandlung eröffnen. Diese Arbeit zeigt die in vivo Generierung von CAR-T-Zellen in Kleintiermodellen mittels eines CD8-targetierten lentiviralen Vektors (CD8-LV). Der CD8-LV wurde bereits zuvor generiert, wobei der lentivirale Vektor mit modifizierten Glykoproteinen des Nipah Virus pseudotypisert und eine Targeting-Domäne gegen den humanen CD8 Rezeptor präsentiert wird. In der vorliegenden Arbeit wurde zuerst der selektive Reportergentransfer in CD8+ Zellen in vivo nachgewiesen. Dazu wurden humane Immunzellen in Mäuse transplantiert und der Vektor systemisch injiziert. Die Expression des Reportergens, ausschließlich in den Zielzellen, wies einen hoch selektiven Gentransfer nach. In vitro Studien zeigten die Generierung von CAR-T-Zellen mittels CD8-LV, der einen CD19-spezifischen CAR in CD8 T-Zellen transferierte. Des Weiteren wurden die Funktionalität der CAR-T-Zellen gezeigt, wie zum Beispiel die selektive Expansion nach Antigen-Stimulus und die spezifische Eliminierung von CD19+ Tumorzellen. Nach Injektion von CD8-LV(CAR) konnte die in vivo Generierung von CAR-T-Zellen nachgewiesen werden, wobei ein bemerkenswert hoher Anteil der CD8 T-Zellen CAR-positive Zellen waren. Dabei war der prozentuale Anteil von transgen exprimierenden Zellen sowie von CD8-positiven Zellen im Vergleich zum Reportergentransfer erhöht, was darauf hindeutete, dass eine selektive Expansion der CAR-T-Zellen stattgefunden hatte. Diese CAR-T-Zellen eliminierten CD19+ Zellen, was darauf hindeutete, dass in vivo generierte CAR-T-Zellen funktional waren. Die Phänotypisierung anhand von Oberflächenmarkern zeigte die Generierung von CAR-T-Zellen mit unterschiedlichem Differenzierungsgrad. Dies ist gerade in Bezug auf die klinische Wirksamkeit von CAR-T-Zellen erwünscht, da unterschiedlich ausdifferenzierte CAR-T-Zellen einerseits wichtige Effektor Funktionen erfüllen als auch proliferatives Potential besitzen. Die anti-tumorale Wirksamkeit wurde in Mäusen überprüft, die humane Tumorzellen transplantiert bekamen. Obwohl das Tumorwachstum nicht verhindert wurde, eliminierten die CAR-T-Zellen die CD19+ B-Zellen und wanderten in verschiedene Organe aus. Dabei wurde eine Organ-spezifische Verteilung von Subtypen beobachtet, wobei der größte Anteil der Effektor CAR-T-Zellen beim Tumor gefunden wurde. Diese Arbeit zeigt das Potential von CD8-LV CD8 T-Zellen in vivo genetisch zu verändern. Selektiver Gentransfer und funktionale in vivo modifizierte Zellen stellen vielversprechende Daten dar, auf denen in der translationalen Forschung weiter aufgebaut werden kann. Der Ansatz Rezeptor-targetierte lentivirale Vektoren in der klinischen Anwendung zu nutzen, bietet einen neuen Weg CAR-T-Zellen herzustellen und würde eine attraktive Möglichkeit eröffnen die CAR-T-Zell Therapie wesentlich zu vereinfachen. Der CD8-LV stellt ein sehr vielversprechendes Instrument für die in vivo Herstellung von CAR-T-Zellen dar und birgt das Potential die personalisierte CAR-T-Zell Therapie zu revolutionieren und eine breit anwendbare Therapiemöglichkeit zu schaffen.